動物源PCR熒光探針法
巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(蘇州)有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產品品牌,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測,非洲豬瘟、藍耳等豬病核酸檢測,牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測,人畜共患病核酸檢測,以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機是巧亦捷系列產品的主打檢測平臺,巧亦捷基于此平臺技術致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。在寵物醫療中,目前病毒檢測主要包括膠體金檢測(試紙)和PCR檢測。動物源PCR熒光探針法
開展動物疫病檢測,有利于及時明確動物病因及根源所在,降低疫病發生率,提高診療效果,促進養殖業可持續發展。可以對動物疫病起到預防作用,真正準確分析當前動物疫病的流行特征及其可能對周邊造成的危害。提高動物產品質量,使人們的食品安全得到盡可能的保障。現階段主流的動物疫病檢測方法主要有傳統檢測、血清學檢測和核酸檢測。核酸檢測作為動物疫病檢測中常用的方法之一,具有實驗周期短、靈敏度高、特異性強、實時定量等優勢。江蘇動物疾病PCR動物檢疫巧亦捷的品牌主張為:用心關愛每一個生命健康。
樣本處理、核酸提取、PCR擴增和數據處理是PCR的四個步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準確地快速地分離細胞或分子材料中的有效核酸,并獲得足夠的樣本為后續實驗提供依據。無論是病毒、細菌還是體細胞,遺傳物質都不是裸露在細胞外,都是在細胞內。需要有一個核酸提取試劑將遺傳物質釋放到外界,保證PCR反應效率。將核酸釋放出來后,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,獲得純度比較高的核酸,比較大限度的保證PCR反應中抑制物的濃度降低,提高核酸檢測的準確性。因此核酸提取與純化這一步,也是保證PCR反應結果的關鍵一步。巧亦捷核酸檢測一體機采用磁珠法提取,效率高且可確保結果更準確。
PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產量的技術,即所謂的聚合酶鏈式反應,這種技術可以在數小時內大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點,PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液、眼鼻分泌物、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復制,再以核酸電泳的方式判讀結果,從而獲得早期、快速、穩定和準確的診斷結果.PCR檢測正越來越多的被動物臨床醫師所接受,并廣泛應用于動物臨床疾病診斷。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環,2-4分鐘即可完成一個循環,2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。寵物傳染病檢測技術方面,核酸檢測方法具有極高的靈敏度和特異性,可很大程度縮短傳染病檢測的窗口期。動物源PCR熒光探針法
傳統的免疫學檢測(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性。動物源PCR熒光探針法
巧亦捷核酸檢測一體機的特異性及靈敏度可達99%以上,使用的PCR熒光探針技術不但可以檢測出病毒的種類,更可以檢測出樣品里100個/ul數量級的病毒數量,可謂特異性極強,準確度極高!若檢測出有病毒,但沒有發病也要引起重視,因為檢測的病毒是一些對動物機體傷害極大的病毒,或者是人畜共患病,雖然現在沒有發病,并不表明以后不會發病,如果任其在體內發展,等到病毒繁殖到一定的數量后,或者機體的抵抗力突然下降,也許就會發生災難性的爆發,對動物造成極大的傷害。動物源PCR熒光探針法
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